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懸浮細(xì)胞貼壁細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)別與注意事項

更新時間:2024-06-28      點擊次數(shù):475


懸浮細(xì)胞培養(yǎng)和貼壁細(xì)胞培養(yǎng)是兩種常見的細(xì)胞培養(yǎng)方法,它們在細(xì)胞生長環(huán)境和實施方法上有顯著的區(qū)別:


1. 細(xì)胞類型和適用性

    懸浮細(xì)胞培養(yǎng):適用于那些本身在體內(nèi)或體外自由懸浮生長的細(xì)胞,如血液細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、血液中的白細(xì)胞等)、某些腫瘤細(xì)胞、部分免疫細(xì)胞等。這些細(xì)胞不依賴于固體表面的支持而能夠生長和繁殖。

 貼壁細(xì)胞培養(yǎng):適用于大多數(shù)常見的培養(yǎng)細(xì)胞類型,如大多數(shù)細(xì)胞系(HEK293、HeLa等)、原代細(xì)胞(如原代培養(yǎng)的人類皮膚纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等)。這些細(xì)胞需要在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的表面上附著生長,

它們依賴于固體表面提供的支持和黏附基質(zhì)來維持其生長和增殖。


2. 培養(yǎng)環(huán)境:

    懸浮細(xì)胞培養(yǎng):通常在含有適當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行,如RPMI-1640、DMEM/F-12等,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)需要通過定期的混合或攪拌來均勻分布,以維持細(xì)胞的生長和代謝需求。

   貼壁細(xì)胞培養(yǎng):需要在含有細(xì)胞黏附支持的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶表面上進(jìn)行。通常需要預(yù)先在表面涂覆膠原蛋白、明膠、聚-L-賴氨酸(PLL)等支持物質(zhì),以幫助細(xì)胞黏附并提供適當(dāng)?shù)纳L條件。


3. 操作方法:

   懸浮細(xì)胞培養(yǎng):培養(yǎng)過程中需要注意避免過度攪拌或攪拌力度過大,以免對細(xì)胞造成機械性損傷或聚集。通常采用輕柔的混合方式來保持培養(yǎng)基中的細(xì)胞均勻分散。

   貼壁細(xì)胞培養(yǎng):培養(yǎng)前需要確保培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶表面干凈無菌,并在表面涂覆適當(dāng)?shù)募?xì)胞支持物質(zhì)。細(xì)胞接種后通常需要在恒溫箱中保持固定的溫度和CO2濃度,以提供穩(wěn)定的培養(yǎng)條件。


總體來說,懸浮細(xì)胞培養(yǎng)和貼壁細(xì)胞培養(yǎng)在細(xì)胞類型的選擇、培養(yǎng)環(huán)境的設(shè)置以及操作方法上有明顯的差異,因此在選擇合適的培養(yǎng)方法時,需要根據(jù)具體的細(xì)胞類型和實驗需求來進(jìn)行合理的選擇。

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